組織培養技術:: 花卉生技核心實驗室 ( 國科會花卉生技產學聯盟::致各位花卉相關產業先進!!! ) - a371010c - Xuite 備份站)
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花卉相關產業先進 台鑒：
依 行政院國家科學委員會「產學技術聯盟合作計劃」（產學小聯盟）補助，並以首年度（ 102 ）成效及執行經驗基礎為來年之延續。因此，籌備及規劃此計劃之工作已於近期開始進行。首年計畫之規劃重點將以「花卉產學技術策略聯盟」為基礎，此番於計畫中成立「花卉生技核心實驗室」，力圖深化產學及學術間的合作交流，亟需縮短產學間的目標差異性。 本聯盟核心實驗室已掌握對於參與開花時間調控、花型發育、老化抑制及雄不稔之關鍵基因群，並擁有如分子選殖、植物再生系統、基因轉殖、分子鑑定及螢光鏡檢等關鍵技術，可有效的應用在經濟花卉之基因改良，例如提早開花時間以調節花卉巿場花期問題；創造嶄新品種以增加巿場競爭力；抑制花器老化，使消費者能有更長的觀賞期，並增加購買意願；或使雄蕊不具開裂能力而不須人工去雄，節省人力物力，更可以提高種子之產量及品質。 現今花卉多由傳統雜交中獲取新品種，但經雜交後產生重大改變的花卉卻是可遇不可求，例如能對抗高溫簇生的花卉、產生迷人的多唇瓣蘭花、具延遲老化不掉落的花瓣。若能經由基因改良轉殖的方式進行改造，並透過組織培養的方式，可繼代培養出高穩定性狀的轉殖植物以獲得特殊新品種，上述皆是傳統雜交較不易獲得之品種。相信較有能力及願景的產業公司，極希望透過基因改造的方式獲得新品種之花卉，以在高競爭力的花卉巿場中佔有一席特殊的地位。 爾後將擴大招募植物花卉生技之技術策略聯盟會員，舉辦生技花卉相關研討會及研習營，並開設生技相關課程以促進知識經驗交流，並深入瞭解花卉產業需求進行技術及策略性評估，改良生技花卉並具生產高經濟價值轉殖植物之貢獻。 本聯盟將舉行北中南區成立說明會，各場次時間與地點如下，敬請轉知 訊息及請踴躍參加。 ( 一 ) 北中區 時間： 102 年 6 月 17 日 ( 星期一 ) 下午 3:00 地點：中興大學食品科技大樓 110 室 ( 二 ) 南區 時間： 102 年 6 月 19 日 ( 星期三 ) 下午 3 時 地點：台南巿後壁區烏樹林 325 號中型會議廳 敬祝 籌安 國科會 花卉生技產學聯盟 計劃主持人 國立中興大學生物科技學研究所 楊長賢 特聘教授 執行長 國立中興大學生物科技學研究所 侯程景 博士 敬上 國科會 花卉生技產學聯盟 國立中興大學 生物科技學研究所 台中巿國光路 250 號
Tel: (04)22840328 Email: [email protected]
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基因選殖透過抽取植物之 RNA 後反轉錄為 cDNA ，或是抽取植物 DNA 後以 PCR 法選殖出感興趣的基因，例如選殖開花基因，使花卉提早開花有助於調節花期，分散一般花期過於集中的情形；花器老化基因的調控可延緩花器的老化，增加觀賞期及價 值 性，本實驗室已深具經驗並已建立完善之基因選殖策略與方法，預期能有效率地選殖各式與花卉生技相關且感興趣的基因加以改造，藉以改善花卉 巿 場所需，提升國際花卉競爭力。
' 啟 動子選殖'本實驗室亦已建立以 PCR 的方法選殖出只在特定部位表達的 啟 動子之方法，只開 啟 特定部位的基因表現，例如使用只在花瓣表達的 啟 動子，藉以專一表達與花器形成相關之基因，以提升花卉的變化性及觀賞價 值 。植物基因轉殖技術 植物老化有很多不一樣的形式與過程，根據其生長情況也有所變化，如一年生植物會在生命週期之特定時間，全株老化衰退。多年生植物則大部分屬於漸進式衰老，由最老的葉片開始衰老掉落，其他部位之葉片會繼續生長。阿拉伯芥的花在授粉後，花蕚、花瓣與雄蕊就會 脫 離，雌蕊發育成果莢。
花授粉後誘導賀爾蒙如生長激素、離層酸 (abscisic acid) 與激勃素 (gibberellin) 等而使花器 脫 離，而交接處分化成為離層，當離層的細胞分解後，器官 脫 離植物。 非直接轉殖法 本實驗室已建立多種植物之農桿菌轉殖 (Agrobacterium-mediated transformation) ，深具此項工作之經驗，透過將含外源基因之質體轉形入可分別感染雙子葉及單子葉之農桿菌 GV3101 或 EHA105 品系中，當農桿菌感染植物後可以將此段基因轉移至植物基因組 內 大量表達，並可以穩定的遺傳給後代。 組織培養再生法 (Tissue culture) ，透過植物傷口誘導 產 生癒傷組織後與農桿菌共感染，經培養及篩選後可以 產 生穩定的基因轉殖植物。本實驗室具有完善的植物生長室、溫室及獨立的組織培養操作室，可全程獨立於實驗室中操作完成及獲得穩定的轉殖植株。花粉管轉殖法 (pollen tube pathway) ，利用針筒將目標基因 DNA 直接由柱頭處注射，等待種子成熟後再篩選具抗生素抗性之轉殖株，便可獲得轉殖成功的植株。
直接轉殖法 基因槍轉殖法：本實驗室具有相關經驗及技術，能將含外源基因的質體 DNA 與金屬粒子 ( 金粉或 鎢 粉 ) ，經由高壓轟擊的方式將質體打入植物組織 內 ，達到短暫表達基因的方法。基因槍可針對不同的植物組織直接進行轟擊，使感興趣的基因大量表現，藉以獲得轉基因的植株。 基因轉殖植物之分子鑑定及分析技術本實驗室已建立完整之轉殖植株篩選及分子鑑定方法，進以確認轉殖之成功，可使用 PCR 技術快速檢定是否含有外源基因之插入，或是使用更具靈敏性且快速之即時定量 PCR (real-time PCR) 於分子鑑定及偵測，藉以測定不同部位的基因表現程度，以此方法可加以監控而獲得穩定轉殖株。另外，更可進一步的使用南方墨點法，測定外源基因插入染色體之拷貝數，以獲得保有性狀且高穩定性的轉殖植物。 GUS 之染色法，可鑑定植物在轉殖入外源性基因後的表現程度及成功率。經基因轉殖改造之植物可經由顯微鏡的鏡檢確定分子型態的變化，或是經由更精確的切片技術配合染色方法或使用雷射掃描式共軛顯微鏡，以穿透式觀察植物細胞狀態，本實驗室透過過去之研究成果，已深具此方面之經驗