母犬的發情特徵和配種最佳時機的掌握
悍威育犬家的經驗分享,心得口述:
犬的發情週期通常是半年左右,也就是一年兩次的概率,當然也有例外,這是受本身的生理因素和飼養環境、氣候所影響的,多多少少會有一些差異。 母犬發情是在換毛後,自身狀態非常良好的前提下進行的,發情的前期症狀是外陰部開始微微腫大,有的母犬還有 駕乘 的舉動,放出來活動時頻頻排尿,脾氣也變得暴躁!這時候飼養者就要開始細心的觀察,特別是在早上清掃犬舍的時候,留意地上有沒有殘留的分泌物,哪怕是發現一滴略帶紅色的分泌物,就要翻看母犬的陰部加以確認,母犬頭2-3天的分泌物不是很多,有的也被自己舔掉了,不留意觀察也就難以發現;頭2-3天分泌物的顏色也不是很紅,在往後的幾天會逐漸加深,到了7-8天後不論顏色和分泌的數量為一個頂峰,外陰部腫脹也很明顯,再往後的幾天就逐漸變淺;健康母犬分泌物的顏色很鮮明富有光澤。
那又如何掌握配種的最佳時機呢?
最常規的做法就是計算時間,大多數就是把握在 12 - 14 天左右開始交配,根據母犬的年齡來做一些調整,年齡大一些的母犬,時間就往後推一些;有的人索性不記時間,只要 母犬將尾偏向一邊 (俗稱 讓尾 )就讓公犬進行交配了;由於母犬個體生理差異不一樣,我的做法從多方面進行的,來確保母犬的受孕率和產量。 計算時間可以作為一個常規依據 , 同時要觀察分泌物的色澤變化 ; 也要注意母犬陰部的質感和外形變化 , 所得出的結論 ,就是我所掌握的最佳配種時機!而母犬 讓尾 這一舉動,只要經過觸摸和觀察就不難發現,一旦母犬發情在7-8天左右,大多數的母犬都會有 讓尾 的舉動,這只能說明母犬已經開始排卵了,但不是排卵的高峰期,也就是說不是配種的最佳時機;生理正常的母犬排卵高峰期是在見 紅 後的 13 天左右,從見紅後的7-8天開始排卵,數量也是呈爬坡式的往上攀升直到 13 天左右為一個頂峰,然後就開始往下滑,到18-19天進入消退期,當然這是針對健康的母犬常規的推算方法;還有一些特殊個體,由於年齡和飼養方面的原因所造成的母犬,我們就要綜合其他的方法,觀察色澤的變化, 分泌物由深紅漸變淺 這個過程,這個過程要經過好幾天,只要顏色變到類似 冰紅茶 的顏色,同時也要注意母犬陰部的外觀變化和質感,沒到交配時間的母犬腫脹很明顯,用手指按陰部的上方,肛門的下方,你就會感覺比較硬,當外陰部開始有皺的跡象,這時候你再用手按陰部的上方位置,就會發覺比較 柔軟 ,這就是配種的最佳時機!所以我掌握的配種時間,基本上不算發情時間,都是通過 觀察 和 觸摸 來控制交配時間,由於多種因素,很多母犬發情的正常特徵會比較混亂,基於以上幾種方法會很好的把握配種時間,提高受孕機率和數量。 配種的次數通常2次就已足夠,就是在 初配 後,間隔 36 小時後再 複配 一次,相對來說比較科學和有效!因公犬射出的精液在陰道裏由於脫離了果醣和某些物質的保護,加上在陰道裏的酸性環境中,失去活力和死亡,只要一小部分脫險,繼續前進到達子宮腔,到達子宮腔以後又有大部分失去活力,只有為數不多的精英,能夠到達輸卵管與卵子結合;也就是說精子的受精能力維持在36小時左右:在選擇 複配 的時候,等於重新派一股部隊進入腹地,尋找成熟的卵子進行結合,從而增加受孕的 數量 。大家可能會有疑問!以這樣的推論,是否重複進行交配增加受孕的數量不是會更多嗎?我可以說配2次和配5次,甚至更多次,得到的結果都是一樣!精子和卵子的結合, 達到母犬自身能承受的數量時 ,身體就會發出訊號,讓受孕系統自動關閉拒絕受精,精子和卵子的整個受孕過程約在36小時左右,所以時間掌握是關鍵!而精子和卵子的結合後形成胚泡,就會游離輸卵管,到達子宮腔尋找存活的必需條件,一旦依附在子宮壁這個過程就可以叫 著床 了然後發育成胚胎。 產仔的數量還是由母犬來決定的,只要 把握好配種時間 為上上策!為了提高受孕率,也有使用刺激母犬排卵的做法,也有採取人工受精的方法,在這裏我要說的是——這些手段都是不得已而為之!也有測量體溫和排卵試紙來確認母犬的排卵時間,我個人認為這些方法,遠遠沒有以上所敘的方法來得準確和實惠! 基於卵子和精子的結合,是否就可以斷定萬無一失了呢!在母犬健康正常的情況下,按理論上是沒有問題的,而內部存在一些 不利於受精卵子存活和著床 的因素,同樣可以破壞受孕,這些因素包括 病菌 和 卵巢激素 的缺乏,我不是專科醫生,在這裏沒法一一例舉! 在母犬準備用作繁殖前期的管理,也有一些輔助方法與大家分享,通常在母犬 開始換毛 的時候,就開始補充一些營養,除正常的餵養外,需增加 維生素B群 、 維生素E 、 卵磷脂 ,還得達到每日正常運動量, 有條件 就經常和公犬一起放風,一旦發現滴紅就要公母分開,以免出現早配或者因未到時機母犬抗拒,造成撕咬和公犬多次交配未遂而失去性趣!
配種注意事項
配種要注意的是選擇犬最合適的交配年齡。一般雄犬的配種時間以 1 歲以後為好,母犬最合適的交配年齡,應注意如下因素:
一. 對發情母犬要看管好,防止被非選定的公犬偷配,而影響後代品質;公犬也不允許它外出尋找發情母犬,否則容易傳染疾病,或因爭奪配偶而被其他公犬咬傷。
二. 配種應選擇安靜、清潔的場所進行,除犬主外,不要讓其他閒雜人員圍觀、喧鬧。
三. 配種後不要立即飲水和進行激烈運動,應讓公母犬各回犬舍略做休息。
四. 公犬不要頻繁交配,以免影響健康,縮短種用年限。壯年公犬每天交配一次,隔 3—4 天應休息一天,偶爾在一天內交配兩次,應間隔 6 小時以上,次日必須休息。年青公犬和老齡公犬配種頻率還要降低。在不得已情況下增加配種次數時,應加強營養予以彌補。公犬超過 12 歲,一般不要再讓它配種。
五. 母犬雖然每年可以繁殖兩胎,但生育過密,對母犬和仔犬的體質都有影響。根據母犬的年齡和健康狀總可掌握兩年繁殖三胎或一年一胎比較適宜。超過 9 歲的母犬一般不宜再繁殖。
六 . 對母犬每次開始發情日期、各發情階段持續天數以及交配日期等都要仔細記錄下來,以備日後參考。
犬的發情週期
正常犬每年發情兩次,一般在春季 3—5 月和秋季的 9—11 月各發情一次,母犬發情時,身體和行為會發生特徵兆。
主要表現為如下幾個階段。
前期 : 發情前期。為發情的準備階段,時間約為 7—10 天。生殖系統開始為排卵作準備。卵子已接近成熟,生殖道上皮開始增生,腺體活動開始加強,分泌物增多,外陰充血,陰門腫脹,潮紅濕潤滑,流混有血液的粘液。公犬常會聞味而來,但母犬不允許交配。
中期 : 發情期。是發情徵兆最明顯並接受交配的時期,持續約 6—14 天。外有繼續腫脹、變軟,流出的粘液色變淺,出血減少或停止。母犬主動或停止。母犬主動接近公犬,當公犬爬跨時主動下蹋腰部,臀部對向公犬,將尾偏向一側,陰門開閉,允許交配。發情後 2—3 天,母犬開始排卵,是交配的最佳時期。
母犬發情週期介紹及注意事項
母犬的發情與配種是繁殖工作的一個重要環節。只有正確地掌握母犬的性週期性變化和排卵時期,才能做到適時配種,提高受孕率和繁殖力。
一 . 母犬的性週期
在繁殖學上,根據犬的不同性生理變化,把犬性週期分為四個階段,即發情前期、發情期、發情後期和乏情期。
1. 發情前期 :從陰戶滴出帶有鮮血的粘液開始,到接受公犬爬跨,約 8 日左右( 8.2 土 2.5 日)。在這個時期,卵巢中上一個發情週期所產生的黃體逐漸萎縮,新的卵細胞開始生長;子宮腺體略有生長,生殖道輕微充血腫脹,腺體逐漸增加。其外部表現陰戶逐漸充血腫大,排尿次數增加而量少,尿液吸引公犬嗅聞。母犬興奮不安,喜歡接近公犬並與其戲耍,但無性欲表現(不接受公犬爬跨)。陰道塗片檢查時,主要有核上皮細胞和多量紅細胞和少量嗜中性白細胞。
2. 發情期 :從接受公犬爬跨開始到不接受爬跨為止,即從陰戶滴血的 8 - 18 日。母犬的外陰呈現充血腫脹狀態,隨著時間的增長,充血腫脹程度逐漸加強,到發情盛期達到最高峰;子宮角和子宮體呈充血狀態,肌層收縮加強,腺體分泌活動增加;子宮頸管道鬆弛;卵巢的卵泡發育很快,多數在發情中期排卵。從外部表現看,早期陰戶腫大,未期有所消退,滴出的帶血粘液減少,色由鮮紅變為淡紅,母犬排出的氣味顯著誘惑公犬追逐和爬跨,當公犬舔其陰戶或爬跨時,其四肢站立不動,尾翹起並偏向一側,陰戶屢屢上提,出現性欲要求,交配易成攻。陰道塗片檢查時,主要為角質化上皮細胞,缺乏嗜中性白細胞,紅細胞早期較多,末期減少。
3. 發情後期 :發情期過後,即進人發情後期,約持續 10 日左右,母犬由發情的性欲激動狀態逐漸轉入安靜狀態;子宮頸管道逐漸收縮,腺體分泌活動漸減,粘液分泌量少而粘調;子宮內膜逐漸增厚,表層上皮較高,子宮腺體逐漸發育,卵泡破裂,排卵後開始形成黃體。其外部表現為,陰戶滴出帶血粘液進一步減少,色由淡紅變成暗紅或無色,腫大消退,多數犬不接受爬跨。陰道塗片檢查時,重新出現有核上皮細胞和嗜中性白細胞,缺乏紅細胞和角質化細胞。 4. 乏情期 :指發情後期之後到下次發情前期之間,約 6 個月左右( 7.0 土 1.5 月)。此時母犬的性欲已完全停止,其精神狀態已完全恢復正常。在早期,子宮內膜增厚,表層上皮呈高柱狀,子宮腺體高度發育,增大彎曲,腺體分泌活動旺盛;在後期,增厚的子宮內膜回縮,呈矮柱狀,腺體變小,分泌活動停止;卵巢的黃體已發育完全,因此這個時期為黃體活動時期。其外部表現為陰戶乾癟,無帶血粘液滴出,不願接近公犬,不容許公犬爬跨,公犬對其尿液和身體氣味不感興趣。陰道塗片檢查時,主要有核上皮細胞和少量嗜中性白細胞,缺乏紅細胞。
二 . 影響母犬性週期的因素
季節 :犬有季節性繁殖的特點。一般情況下,母犬一年發情兩次,每次間隔約 6 個月左右。單養犬多數在春秋兩季發情( 3 - 5 月, 9 - 11 月);群養犬(如比格犬)四季各階段都有發情,季節性不明顯,另外,據 Marshall ( 1906 )和 heape ( 1900 )報導,在南美的野生犬和北極圈飼養的犬,也有一年發情一次的,季節性也不明顯。
年齡 :由於年齡增大,老齡犬身體代謝機能下降,發情週期出現紊亂,往往使乏情期延長,而發情前期和發情期縮短。 初情期 :一般小型犬初情期來的早些(如比格犬初情期時間為 6 - 7 月齡),大型犬初情期晚些(如德國牧羊犬初情期則在 8 - 10 月齡)。初情的犬,發情前期和發情期都較長。另外,營養和環境溫度也影響初情,營養水準高的較營養水準低的早,熱帶的較寒帶或溫帶的早。
營養 :由於營養缺乏或過剩(肥胖),也會延長乏情期或導致異常發情。
疾病 :由於卵巢囊腫、子宮蓄膿等生殖器官疾病往往導致乏情期時間過長,或不發情。還有,上一窩產仔過多、連產幾窩等,母犬機體沒能很好地得到調整恢復,也會導致乏情期過長。
母犬異常發情 :( 1 )安靜發情。母犬缺乏發情表現,但其卵巢的卵泡仍發育成熟而排卵。一般當連續兩次發情之間的間隔相當於正常間隔的 2 倍或 3 倍時,即可懷疑中間有安靜發情。引起安靜發情的原因可能是由於有關生殖激素不平衡所致。例如當雌激素分泌量不足時,發情表現就不明顯。促乳素分泌量不足或缺乏,引起黃體早期萎縮,於是孕酮分泌量不足,也會引起安靜發情,因為孕酮分泌量不足,就會降低丘腦下部的中樞對外雌激素的敏感性。( 2 )短促發情。母犬的發情非常短,如不注意觀察,常易錯過配種機會。其原因可能是由於發育著的卵泡很快成熟破裂而排卵,以致縮短了發情期,但也有可能就由於卵泡停止發育受阻而引起。( 3 )斷續發情。母犬發情時短時續,發情時間延續很長(有的母犬發情 30 日還接交配並懷孕),這是因為卵泡交替發育所致,先發育的卵泡中途發生了退化,而另一新的卵泡又再發育,因此產生了斷續發情的現象。( 4 )孕後發情。母犬在懷孕時仍有發情的表現,稱為孕後發情或假髮情。其主要原因就由於激素機能的混亂,亦即黃體分泌孕酮機能不足,而胎盤分泌雌激素的機能亢進所致。
三 . 排卵時期與排卵數
1 、排卵時期 。母犬發情期,即從接受公犬交配開始, 39 - 48 小時,未排卵的犬仍占大多數,到 90 小時後,未排卵的犬就占少數了,排卵過程一直持續到 96 小時,才全部結束。左右卵巢在排卵時無時間差異。總之,母犬排卵時期從發情初期就開始,一般用以下兩點進行判斷: 1. 發情滴血第 8 - 14 日開始排卵( 11.2 土 3.0 天 ) , 2. 從母犬接受公犬爬跨的第 2 日或第 3 日開始排卵。
2 、排卵數 。犬是多胎動物,在一次發情中左右卵巢可排幾個到十幾個卵子( 6.0 士 1.7 )。小型犬排卵數少些,大型犬排卵數多些,老齡犬、過肥犬排卵數少些,青壯年犬排卵多些。犬的排卵數可根據出生胎兒數進行推斷,也可通剖解檢查卵巢黃體位點,進行準確判斷。一般情況下,排卵數約 89 %受孕、妊娠,極少在受孕後胚胎死亡或融解。
四 . 適時配種
母犬發情後,要想做到適時配種,就必須掌握排卵受孕的最佳時期。據報導,在排卵前 54 - 41 小時交配,卵子受孕率為 79 %;在排卵開始到 120 小時之間交配,卵子受孕率為 83 %,這是卵子受精最佳時間。因此,交配時機不能過遲或過早。過遲卵子失去受精能力,過早精子失去活力或死亡。在母犬接受交配後 2-4 日間(即接受交配後 60 - 108 小時)交配,受孕率和產仔率最高。
五 . 母犬發情時應注意的事項
1 、加強飼養管理,不能隨意散放,嚴防亂配,導致品種混雜。
2 、加強衛生消毒工作,保證周圍環境和陰戶衛生,防止生殖道感染。
3 、如果正在訓練中的母犬發情,一般不宜再進行訓練,要停訓半個月左右。因為發情的母犬興奮不安,尋求公犬,易產生外抑制,服從性也下降。
4 、每日要認真觀察記錄發情徵候,準確掌位發情進入的階段,以便做到適時配種。
六 . 配種時應注意的事項
1 、初情母犬 一般不宜配種,因此時只是性成熟,身體未達到完全成熟,否則會導致自身生長發育受阻,同時也會使繁殖力下降。
2 、初配年齡 。一般母犬為 1.5 歲(以第 2 次發情時交配為宜),公犬為 2.0 歲。
3 、交配次數 。母犬在一次發情中,配 l - 2 次,兩次間隔以 48 小時為好。公犬一年配種 40 - 6O 次,一週之內不超過 2 次為佳。
4 、交配的時間與地點 。南方夏季在早晚進行,北方冬季應上午或下午進行。地點應選擇清靜的環境,最好是公母犬都熟悉的地方,這對膽小的母犬尤為重要,避免人群影響交配。
5 、性經驗 。初配的母犬,由於缺乏性經驗,特別是從小單養的又沒接觸過公犬的,即使已到發情時,也不讓交配,這時只有主人輔助進行(一手抓脖圈一手托下腹部)。初配的公犬,由於缺乏性經驗,一旦與母犬接觸,往往慌張猶豫,或不經勃起即行爬跨,或出現不完全的性行為,經過幾次才能進行正常的性行為。為此應溫和對待,否則容易造成性抑制。最好是先讓一頭有性經驗母犬與其配種。
6 、公犬性抑制 。營養和運動不足、性經驗缺乏、公犬連配數頭母犬等,都會導致公犬性抑制。除此之外,通常都是由於錯誤或粗暴的管理導致性抑制。在采精時某些不正確的操作也會造成性抑制。因為性抑制往往是由於交配或采精時的恐懼、痛感和干擾引起的,結果還會變成陽萎。
7 、配前性刺激 。在交配前不久,通過感覺的性刺激對配種很有利。應當讓公母犬一塊遊戲、追逐一段時間,適當地牽制公犬的性行為。幾次的空爬跨,不會因此引起性抑制,經過 5 - 10 分鐘和 4—6 次這樣的起落的徒勞爬跨,最後反而能提高公犬的射精量和精液濃度,精子活力也良好。配前性刺激不但能提高射精的容量,改進精子密度和活力,而且能引起釋放促黃體素,隨即提高血中膏酮的濃度。
8 、三配三不配和一早一遲 :有相同優點、青年犬之間、公犬等級高於母犬的配;三不配:有相同或相反缺點的、老齡犬之間、公犬等級低於母犬的不配;一早一遲:老齡母犬宜早配(以滴血 8-10 日配),青年母犬宜遲配(以滴血 12 - 14 日配)。
中後期 : 發情後期。外陰的腫脹消退,逐漸恢復正常,性情變得安靜,不准變得安靜,不准公犬靠近。一般維持兩個月,然後進入乏情期。如已懷孕,則發情期後為懷孕期。
後期 : 乏情期。生殖器官進入不活躍狀態。一般約為 3 個月左右,然後進入下一個發情前期。
公犬發情無規則性,在母犬集中發情的繁殖季節,睾丸進入功能活躍狀態,當接近發情母犬時,嗅到母犬發情時的特殊氣味,便可引起興奮完成交配。
母犬的發情週期及排卵時間的確定
母犬的發情週期及排卵時間與其他家畜有較大區別。尤其是排卵時間在發情期間的變化範圍較大,常常造成養犬愛好者難以確定其準確的配種時間。下面就對母犬的發情週期及排卵時間的確定方法進行簡單的介紹。
性成熟及適宜的配種年齡 :
母犬的性成熟因品種、飼養管理條件及地理環境不同而異,一般來說,小型犬達到性成熟的年齡早,而大型犬達到性成熟的年齡要晚一些。達到性成熟的時間一般在 6-13 月齡的範圍內,配種時間應較性成熟的年齡晚些,在德國母犬配種的時間是由當地的育種協會決定的,通常在性成熟後的第 2 次發情時進行配種。
發情週期 :
1. 大多數母犬的發情週期持續 6—8 個月,有的母犬的發情週期持續 12 個月也被認為是生理性的。發情週期分為發情前期、發情期、發情後期和間情期 ( 休情期 ) 。從陰道內開始排出血液至接受交配的時間為發情前期,持續 7-13 天。母犬接受交配的時間為發情期,持續時間為 3-21 天,平均為 9 天左右。一般將黃體功能期視為發情後期。大多數母犬在發情後期的 2(1—5) 天內仍然接受交配。發情後期的持續時間為 9-12 周,到這時黃體己完全溶解。但許多作者把發情後期並不定義為至黃體溶解時,而是至子宮內分泌活動完全停止時,此期持續時間為 18-20 周。發情後期至發情前期出現的一段時間為間情期,間情期內母犬雖然沒有發情表現,但檢查發現,在間情期內卵巢內有 3-4 次的卵泡發育及退化過程,血液中也有輕度的雌激素水準升高,此期持續 1-3 個月,最終進入發情前期。
2. 卵泡發育期大約為 10 一 12 天,這期間雌激素水準不斷升高。雌激素通過血液迴圈到達靶器官,造成陰門、陰道、子宮和輸卵管的水腫及增生過程。黏膜上的血流量增多,子宮黏膜的血細胞滲出進入子宮腔並與子宮的分泌物相混合。卵泡期的末期可在血液中測到最高濃度的 17β 雌二醇含量。伴隨著卵泡中雌激素合成的開始減少,在血液中出現由垂體前葉分泌的 LH 峰值,同時促卵泡素 (FSH) 也釋放 (FSH 分泌的調節機制在犬的發情週期中尚不能被完全解釋清楚 ) 。 LH 峰值的出現與卵泡顆粒細胞黃體化的形成同時出現。大多數母犬在這個時候開始接受交配。 LH 峰值出現後的 2 天發生排卵。所排出的卵子 2-3 天后具有受精能力,伴隨著排卵過程開始形成黃體並不斷加強孕酮的產量。在孕酮的作用下,生殖道黏膜的腫脹情況開始減退,子宮血管壁開始變厚,進入子宮內分泌期。
最佳配種時間的確定方法 :
若能在母犬的排卵時間予以配種的話,則能收到最佳的妊娠效果。但遺憾的是到現在為止在臨床實踐中尚未找到一種非常可靠的確定母犬排卵時間的方法。不過用幾種方法進行綜合判定常能取得較好的效果。間接確定母犬排卵時間的方法可通過觀察母犬陰道黏膜的顏色的變化。陰道細胞學檢查法及測孕酮的方法。值得提出的是單靠某一種方法尚不能肯定說出母犬的確切的排卵時間。
僅以發情前期、發情期的表現去推斷母犬的排卵時間是很難確定的,因其變動範圍很大。通過測陰道上皮的角質化亦不甚理想。而觀察陰道黏膜細胞的浮冰樣堆積及測孕酮量顯得相對接近。但孕酮水準的開始升高,也有較難把握之處。因此,若想較難確的測定母犬的排卵時間,需要採取綜合判定的方法。
開腔器檢查 :
亦是陰道檢查法對於確定母犬的發情具有一定的說服力。此法一般在站立保定下進行,需要大小適度的犬用開腔器及專用的光源。首先用軟紙將陰門周圍擦乾淨,然後用左手的大拇指和食指把陰門口輕輕的翻開,以保證開腔器的前端直接與陰道黏膜接觸。右手持已消毒完好的、與體溫接近的、澆上一些生理鹽水以保證潤滑的開腔器緩緩的插入陰道。起初開腔器的方向朝上,然後水準向前推。達到一定深度後,在專用光源的幫助下,觀察陰道黏膜顏色及分泌物等。檢查結果與判定:判定母犬發情期的不同時期主要根據陰道黏膜的顏色變化、教膜的腫脹情況及分泌物的多少。判定標準難確定雌激素的增多是以上變化的主要原因。如陰道黏膜的水腫、增生及角質化等。在間情期陰道黏膜上皮只有 2-3 層,故黏膜上血管明顯,呈玫瑰紅。而在發情期,由於雌激素的作用,陰道黏膜上皮達到 15-20 層,故陰道黏膜顏色變白及形成特有的浮冰樣堆積。
陰道細胞學檢查 :
陰道上皮的組織學構建受雌激素的影響很大。在間情期陰道黏膜由 2-3 層非角質化的扁平上反覆蓋。在雌激素的影響下細胞層增生且表層細胞角質化,最大程度的細胞增生可以達到 20 層。角質化的過程發生在發情期。從發情後期開始陰道上皮逐漸退化。陰道細胞學檢查的目的即在此基礎上達到認識發情週期的時間、確定排卯時間及瞭解卵巢功能狀況等。陰道細胞學檢查可在做陰道檢查的同時用無菌的棉拭子在陰道深處輕輕擦拭一下以采得陰道黏膜上皮 ( 陰道前庭處的陰道黏膜上皮受雌激素的影響不大,故要在陰道深處採樣 ) ,然後在載玻片上輕輕的滾一下。用帕帕尼科方法染色。但此法比較複雜,需要較多時間。目前德國漢諾威獸醫大學繁殖醫學院使用的是一種工廠化生產的專用染色劑,染色時非常方便,且效果非常好但其詳細成分不清。陰道黏膜上皮亦可用姬姆薩方法染色、陰道細胞染色的判定標難主要是根據細胞的大小、形狀、細胞核與細胞漿成分的比例及核內物質的存在與否。
在發情中期看到的是基底細胞或副基底細胞為主,這些細胞在發情前期消失,形成中間細胞和淺層細胞。除上皮細胞之外,在發情前期還有大量的紅細胞滲出並能觀察到少量的白細胞。
在發情前期向發情過渡時,淺層細胞增多,且逐漸的角質化。在接近排卵時看到的幾乎都是角質化的表層細胞 (80 % -90 % ) ,這些細胞單個的平位於載玻片上。檢驗證明,大約 75 %的母犬在最大角質化程度後的第 1 天發生排卵。最大角質化程度持續 1-6 天,平均 2.6 天。
在發情期的後期表層角質層細胞幾天之內逐漸脫落,陰道細胞抹片的角質化細胞相互連接。在這個再生過程中陰道黏膜層也出現了白細胞,在發情後期的 2-4 天內陰道抹片上可見到大量的白細胞,同時重新出現深層細胞。
在發情後期的早期做陰道細胞抹片間或可見到泡沫細胞 ( 空泡細胞 ) 及發情後期細胞 ( 限制性基底細胞,其細胞漿中含有中性粒細胞 ) 。後一種細胞為發情後期的典型特徵。但在陰道炎時也有類似的現象。個別母犬在陰道黏膜的再生過程中常伴有大量炎性細胞的產生,引起膿性細胞的排出,此點要與子宮疾病區別開來。發情週期中陰道細胞抹片不同細胞的分佈情況 .
孕圍測定 :
到目前為止確定母犬排卵時間的範圍最可靠的方法是測定孕酮。因為孕酮在發情前期即將結束時開始升高,一般在達到 5ng/ml 時即可排卵。臨床實踐中通常這樣處理:母犬動情之後 ( 開始進入了發情前期 ) 可每 2 天進行一次陰道黏膜及陰道細胞學檢查,只要陰道細胞角質化達到了 50 %,即可采血進行孕酮測定孕圍量達到 4-5ng/ml 時,即可對母犬配種。發情週期中孕酮濃度的變化